篤瑪 牛脂蛋白a(LP-a) ELISA 試劑盒 產品信息
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
3. 血清:使用不含熱原和毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分
離。
4. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
5. 細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
6. 組織勻漿:將組織加入適量理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
7. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍
公司秉承價格低,品質*,客戶之上的原則努力將優秀的科學產品提供給廣大的科研工作者。
篤瑪 牛脂蛋白a(LP-a) ELISA 試劑盒 產品信息
常用標簽包括有Flag、myc、HA、His、GST、GFP、MBP等。
Flag標簽系統利用一個短的親水性八氨基酸肽(DYKDDDDK)融合到目標蛋白;其純化條件是非變性的,因此可以純化所有有活性的融合蛋
白。
His標簽是由6個組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽,專門設計用于重組蛋白的吸附純化。由于分子量小,且較容易分離和
純化,是目前使用較廣泛的一種。
GST標簽體系具有蛋白表達率高,表達產物純化方便,利于GST抗體制備的特點。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可從細菌裂解液中提取,
在不變性的條件下通過親和層析得到。
GFP或其突變體EGFP等廣泛用于基因表達效率的檢測,以及和目的蛋白融合表達用于檢測目的蛋白的表達和分別。GFP抗體不經可以檢測
GFP或其適當的突變體,也可以檢測和GFP或其適當的突變體融合表達蛋白的表達、細胞定位,以及純化、定性或定量檢測GFP融合表達
蛋白等。
Myc標簽(序列為:EQKLISEEDL)已成功應用于WB雜交技術、免疫沉淀IP和流式細胞術中。因此可用于檢測重組蛋白在細菌、酵母、昆蟲
細胞和哺乳細胞中的表達情況。Myc重組蛋白質可通過偶聯Myc標簽抗體到活化的瓊脂糖上而進行親和純化。但Myc重組蛋白的低pH洗脫條
件往往會降低蛋白質的活力,因此Myc標簽系統廣泛應用于檢測但很少用于純化。
HA標簽系統利用一個HA(influenza hemagglutintin epitope:YPYDVPDYA)短肽融合到目標蛋白。HA標簽可位于蛋白質的C端或N端,該系
統已廣泛應用于多種細胞類型,相應的HA標簽抗體也被廣泛運用。
MBP標簽蛋白大小為40kDa,由大腸桿菌K12的malE基因編碼。MBP可增加在細菌中過量表達的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。如果蛋
白在細菌中表達,MBP可以融合在蛋白的N端或C端。可用MBP抗體或表達的目的蛋白特異性抗體檢測MBP標簽標記的重組蛋白。
其余標簽抗體還有V5、GFP、RFP、β-Actin、β-Tubulin、GAPDH、ERK1、AU1、Avi、B、CBP、DDDDK、E、E2、Glu-Glu、HAT、HPC4、HSV
、KT3、KLH、MAT、Protein A、S、S1、SNAP、SRT、NWSHPQFEK、SUMO、T7、Tag-100、TAP、Trx、Ty1、TF、Universal、VSV-G等,但應
用相對較少。
篤瑪 牛脂蛋白a(LP-a) ELISA 試劑盒 產品信息
樣品準備
1. 手術取出動物組織,并秤重以確定200毫克組織重量
2. (選擇步驟)放進預冷的15毫升錐形離心管
3. (選擇步驟)加入xx毫升 清理液(Reagent A)清洗1次
4. 即刻用刀片切碎組織
5. 放進一個預冷的15毫升錐形離心管
6. 加入預冷的xx毫升 清理液(Reagent A)
7. 渦旋震蕩5秒,充分混勻
8. 即刻放入預冷的DOUNCE勻漿器,在冰槽里用勻漿棒勻化組織(約40至80下)
9. 將所有組織勻漿物移入1.5毫升離心管
10. 放進4℃臺式離心機離心10分鐘,速度為10000g
11. 移取500微升到新的1.5毫升離心管
12. 加入xx微升 穩定液(Reagent B),混勻
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