新西蘭馬血清
新西蘭馬血清
作用:
1、提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。
2、提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力。
3、有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。
4、是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。
5、起酸堿度緩沖液作用。
6、提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
胎牛血清是品質高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分少;牛血清是細胞培養中用量大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,常用于動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。
GIBCO馬血清16050-122 常見問題:
1、改變培養液的pH值 牛血清的pH理論值為7.0~8.0,培養基在加入規定量的碳酸氫鈉后(即達到細胞生長所需要的滲透壓),再加入10%的牛血清,一般會使培養液的pH值發生改變。因此在使用過程中應注意pH的變化,如有必要可用1mol/L NaOH或1mol/L HCl調pH到所需值。
2、由于血清的營養成分豐富,非常適合細菌、真菌和支原體等生長。國產血清大部分采用手工分裝,因此容易把微生物帶入而使得血清被污染。使用前如果沒有及時發現,將會把污染物帶入正在培養的細胞中,而使得細胞不能正常生長。
3、血清在貯存解凍過程中會產生沉淀,這是由于血清中含有大量脂蛋白、纖維蛋白及多肽類物質,在-15℃冷凍保存解凍后就會自然形成沉淀,隨著保存時間的延長,沉淀量會增加。因此在融化血清時一般應先在4℃放置使之解凍,然后放在室溫使血清*融化,以避免沉淀的增加。添加血清時應避免把沉淀加入培養液,否則由于沉淀的存在會使得所培養的細胞產生大量黑點,或者細胞表面將會覆蓋一層油狀物質,影響細胞的正常生長。為減少血清的損失,可以把有沉淀的血清收集起來進行離心處理,將上清液加入培養液使用(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾)。
正確儲存方法:將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規則地搖晃均勻。長時間儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,*在-20℃以下儲存血清,并避免反復凍融。我們建議血清應保存在-2O℃。若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內(由于血清結凍時體積會增加約10 %, 必須預留此膨脹體積之空間,否則易發生污染或容器凍裂之情形),再放回冷凍。