人載脂蛋白A5檢測試劑盒(ELISA)Human ApoA5 Assay Kit - IBL
產品規格
96T
產品預期用途
本產品僅供科研用,不用于臨床診斷。
檢測原理
該載脂蛋白A5檢測試劑盒是固相夾心ELISA(酶聯免疫吸附測定)。當將第一抗體包被在平板上時,將樣品和標準品加入到板孔中進行第一次反應。 反應后,加入HRP-綴合的二抗進入板孔進行第二次反應。 沖洗掉未結合的二抗后,將四甲基聯苯胺(TMB)加入孔中并顯色。
檢測樣本
人血清和EDTA-血漿
儲存條件
2-8℃保存,有效期見試劑盒外包裝
試劑盒成分
1 預包被板: 抗人ApoA5(53A2)鼠單克隆抗體 96T x 1
2 酶標記抗體:
(30倍濃縮)HRP標記抗人ApoA5(63A2) 小鼠IgG Fab’) 0.4mL x 1
3 標準品: 重組人ApoA5 0.5mL x 2
4 EIA緩沖液: 30mL x 1
5 標記抗體稀釋液: 12mL x 1
6 顯色劑: 15mL x 1
7 終止液: 12mL x 1
8 濃縮洗滌液: 50mL x 1
實驗所需器材(但試劑盒沒有提供)
酶標儀 微移液管及其槍頭
量筒及燒杯 去離子水
冰箱(4°C) 坐標紙(log/log)
吸水紙 試管(用于標準品稀釋)
洗瓶 (用于洗板) 孵育器(37±1℃)
一次性試劑管(用于濃縮酶標記抗體和顯色劑)
操作注意事項:
1) 收集后應盡快測定樣品。對于樣品的儲存,凍存并避免反復凍融。在低溫下解凍測試樣品,并在測量前將其混合。
2) 樣本應用本試劑盒中所含的“4,EIA緩沖液”稀釋。
3) 建議對測試樣品和標準品進行重復測量。
4) 每個測定應運行標準曲線。
5) 在中性pH范圍內使用測試樣品。有機溶劑的污染可能影響測量。
6) 使用前,將所有試劑置于室溫(R.T.)并在使用前輕輕混合。混合后,確保試劑質量無變化。
7) 僅使用本試劑盒中包含的“8,濃縮洗滌緩沖液”,進行洗板。洗滌不足可能導致測量失敗。
8) 推薦使用洗板機(等待時間為零秒)。每次反應后立即用洗板機清洗酶標板。如果你使用洗滌瓶子代替洗板機,在每個板孔中填充洗滌緩沖液后,立即將板倒置并搖動,以清除洗滌緩沖液。按照測量程序第3節中描述的測量次數進行洗滌。應洗滌的要求進行,以避免任何不充分的洗滌。
9) 每個洗板程序的最后一次洗板后,將酶標板在吸水紙上拍干,以清除任何殘留的洗滌液。
10) “6,Chromogen-TMB溶液”應由于其對光敏感性而在黑暗中儲存。也應避免與金屬接觸。每次使用應根據所需要的量取出到收集容器內備用。
11) 將TMB溶液加入孔中后,液體逐漸變為藍色。在這個過程中,反應板應置于黑暗中。收集容器中剩余的TMB的溶液不能返回原來的瓶子,以避免污染。
12) 應在加入“7,終止液” 30分鐘內完成O.D. 測量。
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