多糖多酚復(fù)雜植物RNA快速提取試劑盒
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 產(chǎn)品編號 規(guī)格
多糖多酚復(fù)雜植物RNA快速提取試劑盒 HRN040 50T
產(chǎn)品描述
本產(chǎn)品是無bf或氯仿的RNA的提取試劑盒,組分中包含的基因組DNA清除柱可以有效清除gDNA殘留,獲得的RNA不需要DNase消化,可直接用于反轉(zhuǎn)錄PCR、熒光定量PCR等實(shí)驗(yàn)。組分中的裂解液能快速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞的RNA酶, 離心沉淀去除多糖多酚和次級代謝產(chǎn)物,獲得的裂解混合物用乙醇調(diào)節(jié)RNA結(jié)合吸附到基因組DNA清除柱上,然后RNA被選擇性洗脫濾過,吸附在基因組DNA清除柱上的殘留DNA不會被洗脫。濾過的RNA用乙醇調(diào)節(jié)結(jié)合條件后,RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細(xì)胞代謝物,蛋白等雜質(zhì)去除, 最后低鹽的RNase free H20將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1.不使用有毒的bf,氯仿等試劑,也不需要乙醇沉淀等步驟。
2.簡捷,單個(gè)樣品操作一般可在25分鐘內(nèi)完成。
3.基因組DNA清除柱技術(shù)可以有效清除gDNA殘留,得到的RNA不需要DNase消化,可用于反轉(zhuǎn)錄PCR、熒光定量PCR等實(shí)驗(yàn)。
4.可以提取包括復(fù)雜中草藥如石斛/丹參/雪蓮/人參、復(fù)雜淀粉種子如水稻/小麥/玉米種子、復(fù)雜果實(shí)如葡萄/藍(lán)莓/草莓/西瓜果實(shí)、復(fù)雜抗逆植物如冬青/松針/沙棘/胡楊、復(fù)雜花卉月季/玫瑰/梅/牡丹花、復(fù)雜多糖植物紫菜/仙人掌/蘆薈/百合鱗莖/水稻種子等數(shù)樣品。
5.多次柱漂洗確保高純度,OD260/OD280典型的比值高達(dá)2.1~2.2,基本無DNA殘留,可用于RT-PCR,Northern-blot,二代測序和各種實(shí)驗(yàn)。
運(yùn)輸和保存方法
1)本試劑盒在室溫儲存12個(gè)月不影響使用效果。
2)不合適的儲存于低溫(4℃或者-20℃)會造成溶液沉淀,影響使用效果,因此運(yùn)輸和儲存均在室溫下(15℃-25℃)進(jìn)行。
3)避免試劑長時(shí)間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、PH值變化,各溶液使用后應(yīng)及時(shí)蓋緊蓋子。
注意事項(xiàng)
1.所有的離心步驟均可在室溫完成(4℃離心也可以),使用轉(zhuǎn)速可以達(dá)到13,000 rpm的傳統(tǒng)臺式離心機(jī),如Eppendorf 5415C 或者類似離心機(jī)。
2.需要自備β-巰基乙醇,乙醇,研缽(可選)。
3.樣品處理量絕對不要超過基因組清除柱DA和和RNA吸附柱RA處理能力,否則造成DNA殘留或產(chǎn)量降低。開始摸索實(shí)驗(yàn)條件時(shí),如果不清楚樣品DNA/RNA含量時(shí)可使用較少的樣品處理量,將來根據(jù)樣品試驗(yàn)情況增加或者減少處理量。
4.裂解液CLB和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作時(shí)戴乳膠手套,避免沾染皮膚,眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時(shí),要用大量清水或者生理鹽水沖洗。
5.關(guān)于DNA 的微量殘留:
一般說來任何總RNA提取試劑在提取過程中無法避免DNA的微量殘留(DNase消化也無法做到100%無殘留),本公司的RNA提取產(chǎn)品,由于采取了本公司的緩沖體系和基因組DNA清除柱技術(shù),絕大多數(shù)DNA已經(jīng)被清除,不需要DNase消化,可直接用于反轉(zhuǎn)錄PCR和熒光定量PCR。個(gè)別特殊情況如DNA含量過于豐富造成殘留或者要進(jìn)行嚴(yán)格的mRNA表達(dá)量分析熒光定量PCR,我們建議在進(jìn)行模板和引物的選擇時(shí):
1)選用跨內(nèi)含子的引物,以穿過mRNA中的連接區(qū),這樣DNA就不能作為模板參與擴(kuò)增反應(yīng)。
2)選擇基因組DNA和cDNA上擴(kuò)增的產(chǎn)物大小不一樣的引物對。
3)將RNA提取物用RNase-free的DNase I 處理。本試劑盒還可以用于DNase I處理后的RNA清潔(cleanup) ,請聯(lián)系我們索取具體操作說明書。
4)在步驟去蛋白液RW1漂洗前,直接在吸附柱RA上進(jìn)行DNase I柱上消化處理。購買DNA酶柱上消化試劑盒(貨號:RN34)前可先索取具體操作說明書。
6.本產(chǎn)品僅作科研用途!
天津天正信達(dá)供應(yīng):RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR試劑盒 、提取試劑盒、色譜進(jìn)樣瓶、培養(yǎng)基瓶、試劑瓶、胎牛血清、染色液、試劑瓶、QPCR試劑盒、生物試劑、抗體、瓊脂糖、實(shí)驗(yàn)耗材,移液器等我司擁有一支覆蓋生物化學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)等專業(yè)人員的研發(fā)、構(gòu)建了儀器設(shè)備齊全的實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺,主要包括AKTA、高壓均質(zhì)機(jī)、全波長酶標(biāo)儀、高速落地離心機(jī)和qPCR儀等大型儀器設(shè)備。