植物1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(RuBisCO)ELISA試劑盒說明書?
TZXD-4938 植物1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(RuBisCO)ELISA試劑盒
一、產(chǎn)品概述?
檢測(cè)原理?:采用雙抗體夾心法(ELISA)檢測(cè)樣本中RuBisCO含量,通過HRP酶催化底物顯色,顏色深淺與目標(biāo)物濃度正相關(guān)。
適用樣本?:植物組織勻漿、葉片提取液、細(xì)胞裂解液等。
檢測(cè)范圍?:通常為0.1–50 ng/mL(不同品牌可能略有差異)。
二、試劑盒組成?
組分 規(guī)格(96T) 保存條件
包被微孔板 12孔×8條 2–8℃干燥
RuBisCO標(biāo)準(zhǔn)品 0.3 mL×6管(濃度梯度) -20℃長(zhǎng)期保存
HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體 10 mL×1瓶 避光2–8℃
TMB顯色液 A/B液各6 mL 避光2–8℃
終止液 6 mL×1瓶(2M H?SO?) 室溫
20×洗滌緩沖液 25 mL×1瓶(需稀釋) 2–8℃
(注:48T規(guī)格用量減半)
三、操作步驟?
樣本制備?
植物組織:按質(zhì)量比1:5–1:10加入PBS勻漿,1000×g離心20分鐘取上清。
避免使用含NaN?的緩沖液(抑制HRP活性)。
檢測(cè)流程?
步驟1?:加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本(100 μL/孔),37℃孵育1小時(shí)。
步驟2?:洗滌5次(每孔加滿洗滌液,靜置30秒后甩干)。
步驟3?:加入HRP標(biāo)記抗體(50 μL/孔),37℃孵育30分鐘。
步驟4?:再次洗滌,加入TMB顯色液(各50 μL/孔),避光反應(yīng)15分鐘。
步驟5?:加入終止液(50 μL/孔),立即用酶標(biāo)儀測(cè)定450 nm OD值。
結(jié)果計(jì)算?
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度對(duì)數(shù)與OD值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程計(jì)算樣本濃度。
四、注意事項(xiàng)?
質(zhì)量控制?:板內(nèi)/板間變異系數(shù)應(yīng)<10%,標(biāo)準(zhǔn)曲線R2≥0.99。
保存條件?:未開封試劑盒2–8℃保存6個(gè)月;開封后標(biāo)準(zhǔn)品及抗體需-20℃保存。
干擾因素?:高色素樣本(如葉綠素)可能需額外離心或稀釋。
五、技術(shù)參數(shù)?
靈敏度?:通常≤0.1 ng/mL。
特異性?:不與植物其他羧化酶交叉反應(yīng)。
價(jià)格范圍?:48T約1200–1980元,96T約1800–3000元。
(如需詳細(xì)品牌說明書或技術(shù)支持,可聯(lián)系供應(yīng)商獲取。)
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