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貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
AS6321401 | 果膠裂解酶測試盒（比色法） | 100管/48樣 |
AS6321401 | 果膠裂解酶測試盒（比色法） | 50管/24樣 |
測定意義
果膠裂解酶（EC4.2.2.10）是果膠酶的重要組成部分，是一種能降解植物細胞壁，導致植物組織軟化甚至死亡的解聚酶，來源比較廣泛，主要來源于微生物，可用于果汁、果酒的澄清，提高水果出汁率，植物病毒的純化，紙漿的漂白和紡織品的生物精煉，在減少環(huán)境污染和降低能源消耗方面具有潛在的應(yīng)用價值。
測定原理
果膠裂解酶作用于果膠中的α-1,4糖苷鍵，生成在還原端C4和C5之間位置具有不飽和鍵的不飽和寡聚半乳糖醛酸，在235nm處有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器
天平、低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板（UV板）、恒溫水浴鍋。
試劑組成和配制
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體6mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體6mL×1瓶，4℃保存。
試劑三：液體6mL×1瓶，4℃保存。
酶液提取
1．組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。10000g ，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2．細菌、真菌：按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后10000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。
3. 培養(yǎng)液：直接測定。
測定操作表
分光光度計/酶標儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長至235nm，蒸餾水調(diào)零。
操作表
對照管 | 測定管 | |
試劑一（μL） | 120 | |
試劑二（μL） | 120 | |
40℃溫育3min | ||
酶液（μL） | 20 | 20 |
混勻，40℃反應(yīng)30min | ||
試劑三（μL） | 60 | 60 |
混勻于微量石英比色皿/96孔板（UV板）測定235nm處吸光值A(chǔ)，△A=A測定管-A對照管。 | ||
酶活性計算公式
用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1. 組織中PL活性
（1）按照蛋白濃度計算
酶活性定義：在40℃，pH5.5條件下，每毫克蛋白每分鐘分解果膠產(chǎn)生1nmol不飽和半乳糖醛酸所需的酶量為一個酶活力單位。
PL活性（nmol/min/mg prot）= △A÷（ε×d）×V反總÷（V樣×Cpr）÷T
= 64.1×△A÷Cpr
（2）按照樣本質(zhì)量計算
酶活性定義：在40℃，pH5.5條件下，每克組織每分鐘分解果膠產(chǎn)生1nmol不飽和半乳糖醛酸所需的酶量為一個酶活力單位。
PL活性（nmol/min/g 鮮重）= △A÷（ε×d）×V反總÷（V樣×W÷V樣總）÷T
= 64.1×△A÷W
2. 細菌、真菌PL活性
酶活性定義：在40℃，pH5.5條件下，每104個細胞每分鐘分解果膠產(chǎn)生1nmol不飽和半乳糖醛酸所需的酶量為一個酶活力單位。
PL活性（nmol/min/104cell）= △A ÷（ε×d）×V反總÷（V樣×細胞數(shù)量÷V樣總）÷T
= 64.1×△A÷細胞數(shù)量
3. 培養(yǎng)液PL活性
酶活性定義：在40℃，pH5.5條件下，每毫升培養(yǎng)液每分鐘分解果膠產(chǎn)生1nmol不飽和半乳糖醛酸所需的酶量為一個酶活力單位。
PL活性（nmol/min/mL）= △A÷（ε×d）×V反總÷V樣÷T
= 64.1×△A
ε：不飽和半乳糖醛酸摩爾消光系數(shù)：5200L/mol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V樣：反應(yīng)體系中樣本體積，0.02mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W，樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時間，30min
用96孔板測定的計算公式如下
1. 組織中PL活性
（1）按照蛋白濃度計算
酶活性定義：在40℃，pH5.5條件下，每毫克蛋白每分鐘分解果膠產(chǎn)生1nmol不飽和半乳糖醛酸所需的酶量為一個酶活力單位。
PL活性（nmol/min/mg prot）= △A÷（ε×d）×V反總÷（V樣×Cpr）÷T
= 128.2×△A÷Cpr
（2）按照樣本質(zhì)量計算
酶活性定義：在40℃，pH5.5條件下，每克組織每分鐘分解果膠產(chǎn)生1nmol不飽和半乳糖醛酸所需的酶量為一個酶活力單位。
PL活性（nmol/min/g 鮮重）= △A÷（ε×d）×V反總÷（V樣×W÷V樣總）÷T
= 128.2×△A÷W
2. 細菌、真菌PL活性
酶活性定義：在40℃，pH5.5條件下，每104個細胞每分鐘分解果膠產(chǎn)生1nmol不飽和半乳糖醛酸所需的酶量為一個酶活力單位。
PL活性（nmol/min/104cell）=△A÷（ε×d）×V反總÷（V樣×細胞數(shù)量÷V樣總）÷T
= 128.2×△A÷細胞數(shù)量
3. 培養(yǎng)液PL活性
酶活性定義：在40℃，pH5.5條件下，每毫升培養(yǎng)液每分鐘分解果膠產(chǎn)生1nmol不飽和半乳糖醛酸所需的酶量為一個酶活力單位。
PL活性（nmol/min//mL）= △A÷（ε×d）×V反總÷V樣÷T
= 128.2×△A
ε：不飽和半乳糖醛酸摩爾消光系數(shù)：5200L/mol/cm；d：比色皿光徑，0.5cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V樣：反應(yīng)體系中樣本體積，0.02mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W，樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時間，30min
公司正在出售的產(chǎn)品：
HSV-Ag2 ELISA Kit | H-鈣粘著蛋白/H-鈣粘連蛋白ELISA試劑盒 |
Atlastin 2(ATL2)ELISA Kit | NAD合成mei1ELISA試劑盒 |
Megane蛋白ELISA試劑盒 | N-肉豆蔻酰基轉(zhuǎn)移mei1ELISA試劑盒 |
Notchless蛋白ELISA試劑盒 | Rho |
雞白介su18(IL-18)試劑盒elisa | 大鼠Ⅱ(FⅡ)ELISA檢測試劑盒 |
抗中性粒細胞抗體ELISA試劑盒 | 人透明質(zhì)suan結(jié)合蛋白2(HABP2)檢測試劑盒elisa |
人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)ELISA試劑盒 | Pannexin2蛋白ELISA試劑盒 |
人信號識別顆粒抗體(SRP)試劑盒ELISA | 馬勃染料法PCR鑒定試劑盒 |
口蹄疫O型/A型/Asia1型(FMDV-O/-A/-Asia1)核suan檢測試劑盒 | 人乳頭瘤病毒6PCR試劑盒 |
豬皰疹病毒 I 型PCR試劑盒 | 人免疫缺陷病毒1型M群F型RT-PCR試劑盒 |
豬腸道甲型科研PCR檢測試劑盒 | 柯薩奇病毒A16型變種RT-PCR試劑盒 |
貓PCR檢測試劑盒 | IL-1 大鼠白介su1ELISA檢測試劑盒 |
CK-LMW 人低分子量細胞角蛋白ELISA檢測試劑盒 | 口蹄疫病毒A型(FMDV-A)核suan檢測試劑盒 |
Citron蛋白(CIT)ELISA試劑盒 | 人皰疹病毒6型PCR試劑盒 |
信號su4G(SEMA4G)ELISA試劑盒 | cGMP 小鼠環(huán)磷suan鳥苷ELISA檢測試劑盒 |
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