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貨號 | 產品名稱 | 規格 |
AS6321199 | 血清高密度脂蛋白(HDLC)測試盒 | 100管/96樣 |
AS6321199 | 血清高密度脂蛋白(HDLC)測試盒 | 50管/48樣 |
測定意義
高密度脂蛋白為血清蛋白之一,主要由肝臟合成,運載周圍組織中的膽固,再轉化為膽汁酸或直接通過膽汁從腸道排出,是一種抗動脈粥樣硬化的血漿脂蛋白,是冠心病的保護因子,俗稱“血管清道夫”,對冠心病的臨床診斷是一個重要的參考指標。
測定原理
用沉淀劑分離血清中的高密度脂蛋白膽固,利用酯酶催化膽固酯水解生成游離膽固和游離脂肪酸,從而把膽固酯轉化為FC;進一步利用膽固氧化酶催化FC氧化,生成△4-膽甾烯酮和H2O2;再利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比和酚,生成紅色醌類化合物;在500nm有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品
離心機,恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
試劑組成和配制
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體15mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存。臨用前加5mL試劑四充分溶解。
試劑四:液體10mL×1瓶,4℃保存。
標準品:液體1mL×1支,4℃保存。
樣品處理
取血后3小時內分離血清,將血清樣品與試劑一按照1:1的比例充分混勻,25℃靜置15min,2000g離心15min,上清置于冰上待測。
測定操作表
空白管 | 標準管 | 測定管 | |
蒸餾水(μL) | 4 | ||
標準品(μL) | 4 | ||
樣本(μL) | 4 | ||
試劑二(μL) | 150 | 150 | 150 |
試劑三(μL) | 50 | 50 | 50 |
混勻,37℃靜置30min,于1mL玻璃比色皿,空白管調零,測定500nm處吸光值A。分別記為A標準管和A測定管 |
計算公式
用微量石英比色皿測定的計算公式如下
HDL-C含量(mmol/L)= A測定管÷A標準管×C標準管
=5×A測定管÷A標準管
C標準管:5mmol/L
b.用96孔板測定的計算公式如下
HDL-C含量(mmol/L)= A測定管÷A標準管×C標準管
=5×A測定管÷A標準管
C標準管:5mmol/L
注意事項
樣本切勿反復凍融,最好在取血后12小時內完成測定。
配置好的試劑三4℃保存可半個月。
線性范圍為0.15mmol/L-3.8mmol/L。
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