LNCaP clone FGC人前列腺癌細胞
名稱 | LNCaP clone FGC (人前列腺癌細胞) (STR鑒定正確) |
別稱 | LNCaP-Clone-FGC; LNCaP.FGC; LNCaP-FGC; LNCaP FGC; LNCaP-ATCC |
種屬 | 人類 |
年齡（性別） | 男性，50歲 |
組織來源 | 前列腺；左鎖骨淋巴結癌轉移灶 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
背景描述 | 人前列腺癌細胞LNCaP clone FGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨淋巴結針刺活檢中分離，該患者經確診為前列腺癌轉移。LNCaP clone FGC細胞對5-α-二氫睪酮(生長調節子和酸性磷酸脂酶產物)有響應。LNCaP clone FGC細胞并不形成一致的單層，而是形成集落，在傳代時可以用滴管反復吹吸打碎。LNCaP clone FGC細胞僅僅輕輕地吸附在基底上，不形成匯合，很快使培養基變酸。LNCaP clone FGC細胞生長極其緩慢，傳代后48小時內不應擾動。當培養瓶封包后，多數LNCaP clone FGC細胞從培養瓶底分離，懸浮在培養基中。收到后，在通常培養單層細胞的條件下培養24-48小時，以使細胞再貼壁。此后，可以換上新鮮培養液。如果需要，培養瓶內容物可以收集，300g離心15分鐘，以10毫升培養液重懸并培養到一個單獨的培養瓶中。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養基 | RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~32-36小時 |
凍存條件 | 凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 |
培養條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
致瘤性 | Yes, in soft agar.Yes, the cells are tumorigenic in nude mice. |
受體表達情況 | androgen receptor, positive;estrogen receptor, positive |
基因表達情況 | human prostatic acid phosphatase; prostate specific antigen |
注意事項 | （1）這株細胞并不形成一致的單層，而是形成集落。傳代時如消化后細胞形成聚團，可以用滴管反復吹吸打碎。 （2）該細胞僅僅輕輕地吸附在基底上，不形成匯合，很快使培養基變酸。生長很慢。傳代后 48 小時內不應擾動。需使用 Corning 的 cellbind 細胞培養瓶，貨號是 3289；或者使用多聚賴氨酸 包被過的培養皿。 （3）在細胞運輸途中，多數細胞會從培養瓶底分離，懸浮在培養基中。收到后，在通常培養單層細胞的條件下培養 24-48 小時，以使細胞再貼壁。此后可以換上新鮮培養液。 |
保藏機構 | ATCC; CRL-1740 BCRC; 60088 BCRJ; 0149 ECACC; 89110211 |
二、細胞培養操作
1) 復蘇細胞：以下細胞培養凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
a、棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養瓶置于37℃培養箱中消化1-2 min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加2-3ml培養基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中，置于培養箱中培養。
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數。
b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、培養注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象 發生請及時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由 客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養基重懸 細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養基 (灌液培養基) 不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培 養條件新配制的培養基來培養細胞。 收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代。
9. 注意： 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
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