試劑盒名稱:人磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒
人磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒 的標本要求 :
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
產品貨號:H0859Y
規 格:48T/96T
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的操作步驟:
用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法
1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫 酸0.05ml。
6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
組成:
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個 | 1個 | |
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2 |
標準品 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2 |
標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2 |
酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2 |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2 |
20倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 30ml×1瓶 | 2 |
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