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脂多糖提取試劑盒使用中的常見問題問答

2014-12-17 

脂多糖提取試劑盒(LPS Extracton Kit) 

貨號:17141

名稱:LPS Extraction Kit 脂多糖提取試劑盒

產地:韓國iNtRON

規格:100T

LPS背景描述:

 脂多糖(LPS)是革蘭氏陰性菌細胞壁外膜的主要成分,結構很復雜、熱穩定性*(在250℃下干熱滅菌2h才*滅活)。受LPS發現的歷史原因,如今LPS的概念幾乎等同于內毒素(endotoxin)。LPS由多糖鏈和脂質A組成,不同細菌間的多糖鏈是高度變化的,決定細菌的血清型;而脂質A主要影響LPS的毒性作用。LPS可以引起免疫刺激的級聯反應和機體的毒性病理生理活動,包括釋放內毒素引起感染性休克從而導致末梢血管虛脫。臨床常通過檢測LPS的存在來診斷腦膜炎。

正是LPS與機體免疫機能的密切關系,生命科學研究常常提取LPS進行相關的研究,如闡明LPS的結構,代謝,免疫學,生理學,毒性,生物合成途徑;誘導生長促進因子如白介素的合成與分泌;誘導疾病研究的動物模型如炎癥反應,急性肺損傷,

技術參數:

從不同的細菌中提取脂多糖的量,如下表所示:

 

 

 利用脂多糖提取試劑盒從不同的OD600nm的革蘭氏陰性菌中提取LPS,并采用Purpal Assay 定量分析LPS提取量,提取效率列于上表中。同時利用SMARTTM Micro BAS 分析試劑盒分析蛋白的含量,結果顯示蛋白質的含量低于0.2微克。

試劑盒使用中常見問題問答:

Q:我打算提取脂多糖,但是我們的離心機針對15ml的離心管zui大的轉速是10,000rpm。但按照說明書中描述,需要13,000rpm離心10分鐘。想請問我采用10,000rpm下離心30分鐘能達到同樣的效果嗎?

A:可以的,您可以在10,000rpm下離心20-30分鐘,但是我們建議為了達到的效果采用13,000rpm離心10分鐘。

 

Q:我想要提取脂多糖,我能先使用試用裝嗎?

A:脂多糖提取試劑盒是基于酚-水提取法研發的,因此是使用效果好且操作簡單,我們沒有提供試用裝。

 

Q:我想在植物中通過分離多糖來核對其免疫活性,我想知道多糖中是否含有脂多糖。

A:在植物中沒有脂多糖。脂多糖存在于細菌中二各種糖類是存在于植物中。如果您想確認提取的LPS,可使用銀染法。換句話說,在您使用LPS提取試劑盒提取LPS后,您可以利用銀染法簡單地分析LPS的帶形。

 

Q:我一直在使用LPS提取試劑盒,但是產物中還存在少量蛋白。

A:存在較多的蛋白質意味著上樣量太大了,為了得到更好的效果使用建議的樣品用量,如果提取的LPS中存在蛋白,建議使用蛋白酶k來去除。

 

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