熱電液相色譜是一類分離與分析技術,它的特點是以液體作為流動相,固定相可以有多種形式。其中經典液相色譜的流動相是依靠重力緩慢地流過色譜柱,固定相的粒度不能太小,液相色譜法是在經典色譜法的基礎上,采用了氣相色譜的理論,流動相改成高壓輸送,色譜柱是用小粒徑的填料填充而成的,從而使柱效大大高于經典液相色譜;同時柱后連有高靈敏度的檢測器,可對流出物進行連續檢測。
熱電液相色譜法的原理是以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測。
液相以恒定的速率被泵入具有固定相的柱中。在進入色譜柱之前,分析樣品被注入到載波中。到達色譜柱后,基于分析物分子和固定相之間的物理化學相互作用,樣品組分被選擇性保留。
流動相用于將樣品輸送至系統。流動相的基本標準是樣品組分的惰性。通常使用純溶劑或緩沖劑的組合。該流體不含顆粒雜質,并在使用前脫氣。色譜柱是充滿固定相的不銹鋼管。這是一個重要的部分,應根據供應商的說明進行適當維護,以獲得操作后的再現性和分離效率。
分析過程中的溫度變化將導致分離出的洗脫組分的保留時間發生變化。柱溫箱使用空氣循環來保持恒定的柱溫。這確保了流動相通過色譜柱的恒定流速。流動流速的變化會影響樣品組分的洗脫時間,導致誤差。該泵以恒定的壓力向色譜柱提供恒定的流動相流量。
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