大腸桿菌基因工程菌發酵液或細胞培養液中提取生化物質的重要步驟,就是預處理和固液分離。其目的不僅在于分離大腸桿菌基因工程菌體和其他懸浮顆粒,還希望除去部分可溶性雜質和改變發酵液的性質,以利于后續的從澄清的發酵液中采用物理、化學的方法提取代謝產物,或從大腸桿菌基因工程菌出發進行細胞破碎、碎片的分離和提取胞內產物。大腸桿菌基因工程菌發酵液中雜質很多,其中有些雜質不僅直接影響產品質量和得率,同時對后續的提取和精制有很大影響,因此,在預處理時,必須采用適當方法使這些雜質沉淀,在固液分離時除去,以利于后面的提取和精制過程能順利進行。用于大腸桿菌基因工程菌發酵液固液分離的主要是離心分離,我們采用大腸桿菌管式離心機高速旋轉產生的離心力來實現發酵液的固液分離,具有分離速度快、分離效率高,液相澄清度好等優點。
大腸桿菌管式離心機的操作方法:
大腸桿菌管式離心機操作時,待處理的物料在一定壓力(3×104Pa左右)下由進料管經底部空心軸進入轉鼓底,靠圓形折轉擋板散布于鼓的四周。為使液體不脫離轉鼓壁,在轉鼓內設有十字形擋板,液體在轉鼓內由擋板被加快到轉鼓速度,在離心力場下,浮濁液(或懸浮液)沿軸向上流動的過程中被分層成輕液相和重液相(或液相和固相)。并經過上方環狀溢流口排出。改動轉鼓上端別離環的內徑可調節重液相和輕液相的分層界面。處理懸浮液時,可將管式離心劑的重液口封閉,只留有中心輕液溢流口,則固體在離心力場下沉積干轉鼓壁上,到達一定數量后,停機后人工清除。