ELISA的基本原理是將抗原（或抗體）結合到固相載體上，并將抗原（或抗體）與某種酶連接成酶標記抗原（或抗體），在檢測時，將待檢樣本和酶標抗原（或抗體）按一定程序與固相載體上的抗原（或抗體）反應，然后用洗滌的方法去除未反應的部分，加入底物后，底物被結合在固相載體上的酶催化產生有色物質，通過酶標物顯色的深淺間接反映被檢抗原或者抗體的存在與否或者量的多少。

下面分述ELISA實驗各種檢測方法的優缺點：

　　1、直接法（direct ELISA）

　　將抗原直接固定在固相載體上，參加酶符號的一級抗體，即可測定抗原總量，此一級抗體的特異性非常重要。

　　優勢：操作手續簡略，因無須運用二抗可防止交互反響。

　　缺陷：實驗中的一抗都得用酶符號，但不是每種抗體都適合做符號，費用相對進步。

　　2.間接法（indirect ELISA）

　　此測定辦法與直接法相似，不一樣在于一級抗體沒有酶符號，改用酶符號的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。

　　優勢：二抗能夠加強信號，并且有多種挑選能做不一樣的測定剖析。不加酶符號的一級抗體則能保存它最多的免疫反響性。

　　缺陷：交互反響發作的機率較高。

　　3.雙抗體夾心法（sandwich ELISA）

　　被檢測的抗原包被在兩個抗體之間，其間一個抗體將抗原固定于固相載體上，即捕捉抗體。另一個則是檢測抗體，此抗體可用酶符號后直接測定抗原的量；或不符號，再透過酶符號的二級抗體來測定抗原的量。這兩種抗體有必要當心選擇，才可防止交互反響或競爭一樣的抗原聯系部位。

　　優勢：高活絡、高專一性，抗原無須事前純化。

　　缺陷：抗原必定得具有兩個以上的抗體聯系部位。

　　4.競爭法（competitive ELISA）

　　樣本里的抗原（自在抗原）和純化并固定在固相載體上的抗原（固定抗原）一同競爭一樣的抗體，當樣品里的自在抗原越多，就能夠聯系越多的抗體，而固定抗原就只能聯系到較少的抗體，反之亦然。經清潔過程，洗去自在抗原和抗體的復合物，只留下固定抗原和抗體的復合物，拿來與只要固定抗原的對照組成果相比擬，依據呈色區別就可計算出樣品里的抗原含量。

　　優勢：可適用比擬不純的樣本，并且數據再現性很高。

　　缺陷：全體的敏感性和專一性都較差。