斑點熱立克次體IgG檢測試劑盒（酶聯免疫法）

【產品名稱】

通用名稱：斑點熱立克次體IgG抗體試劑盒（酶聯免疫法）

英文名稱：Spotted fever Rickettsia IgG Antibody Kit

【產品規格】

96T

【預期用途】

該試劑盒用于人血清、血漿中抗斑點熱立克次體IgG的體外定性檢測。

【前言簡介】 

斑點熱立克次體出現在全球范圍內，并且通過受到感染的扁虱、螨蟲和跳蚤進行傳播。人體受感染后會誘導產生出特異性的抗體回應，產生的特異性抗體是可以被檢測到的，因此可以被當做一種間接的檢測手法來診斷受感染的人群。

【檢測原理】

試劑盒微孔板中包被有從斑點熱立克次體中提取出的脂多糖（rLPS）。病人血清用樣品稀釋液稀釋，之后樣品被加入到微孔中孵育。孵育過程中，血清抗體與微孔板抗原發生特異性結合。洗板洗去未結合的部分，之后加入酶標的抗人IgG。孵育過后洗板，洗去未結合上的酶聯物。之后加入酶底物液反應。形成藍色，顏色的深度與樣品中特異性IgG的濃度成正比。定時反應后，加入終止液，顏色變黃，微孔板使用酶標儀在450nm下讀取吸光值。

【試劑盒成分】

微孔板       12×8

包被有斑點熱立克次體外脂多糖抗原（rLPS）

樣品稀釋液        2×50ml

含牛血清蛋白及吐溫20、硫化汞的PBS緩沖液 即用型

酶聯物            1×12ml

辣根過氧化物酶標記的抗人IgG  即用型 避光保存

陽性質控          1×120μl      1:10預稀釋

臨界質控          1×200μl      1:10預稀釋

陰性質控          1×120μl      1:10預稀釋

底物液            1×12ml

琥珀色瓶，含TMB底物液以及雙氧水  即用型 避光保存

終止液            1×12ml

含稀釋好的硫酸  即用型  避免接觸皮膚

PBS緩沖液

將試劑盒提供的小包加入到1L蒸餾水中 以配置PBS緩沖液

吐溫20            1×2ml

加入到1L的PBS緩沖液中 配制成洗液。

所需材料（未提供）

1. 蒸餾水

2. 洗瓶

3. 試管

4. 移液器

5. 粘性蓋板

6. 450nm讀數酶標儀

【儲存及穩定】

試劑盒應2-8℃保存，在實驗前應先平衡至室溫（20-25℃）。剩余的微孔板需密封保存在包裝袋中。

【樣品采集及處理】

允許全血樣品凝集，通過離心分離血清樣品。2-8℃下保存。要保存5天以上，請于-20℃環境下保存。

【檢測方法】

洗滌液

將2ml吐溫加入到1L配制好的PBS緩沖液中，混勻。

樣品

使用樣品稀釋液按1:100比例稀釋樣品。

質控品

使用樣品稀釋液按1:10比例稀釋已經預稀釋的質控品。最終得1:100稀釋的質控品。

檢測過程

1. 移取陽性質控、陰性質控、臨界質控、樣品各100μl到相應的微孔中，臨界質控做雙孔檢測。

2. 蓋板，在室溫下孵育60分鐘。

3. 使用洗滌液洗板至少3次，并在吸水紙上拍干。

4. 每孔加入100μl酶聯物。

5. 蓋板，在室溫下避光孵育30分鐘。

6. 洗板同步驟3。

7. 每孔加入100μl TMB底物液，暗光下準確孵育10分鐘。

8. 每孔加入100μl終止液。

9. 使用酶標儀在450nm波長下讀取吸光值。

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