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齊一生物科技（上海）有限公司 |  資料大小 |
26.2KB |
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 資料類型 |
PNG 圖片 |  資料圖片 |
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 下載次數 |
45次 |
土壤過氧化氫酶（Solid-Catalase，S-CAT）試劑盒說明書
分光光度法 50 管/24 樣
正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：
S-CAT是土壤微生物代謝的重要酶類，在H2O2清除系統(tǒng)中具有重要作用。
測定原理：
H2O2在 240nm下有特征吸收峰，通過測定與土壤反應后溶液在此波長下吸光度的變化，即
可反應 S-CAT活性的高低。
土壤過氧化氫酶（Solid-Catalase，S-CAT）試劑盒說明書 需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL石英比色皿和蒸餾水
試劑組成和配制：
試劑一：液體 100μL×5 瓶，4℃保存；臨用前每瓶加入 9.9mL蒸餾水充分溶解后待用；用不
完的試劑 4℃保存；
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入 2mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑 4℃保
存；
試劑三：液體6mL×1 瓶，4℃保存。
樣品處理：
新鮮土樣自然風干或 37度烘箱風干，過30~50目篩。
測定步驟：
試劑名稱 測定管 無基質管 無土管
風干土樣（g） 0.1 0.1
試劑一（μL） 1000 1000
雙蒸水（μL） 1000
25℃振蕩培養(yǎng) 20min
試劑二（μL） 25 25 25
混勻 8000g，25℃離心5min，取 820μL上清
試劑三（μL） 96 96 96
混勻，用蒸餾水調零，240nm處記錄各管 A值。
土壤過氧化氫酶（Solid-Catalase，S-CAT）試劑盒說明書 注意：每個測定管要設一個無基質管，無土管只要做一管。
S-CAT 活性計算：
單位的定義：每天每 g風干土樣催化 1μmol H2O2降解定義為一個酶活力單位。
計算公式：S-CAT（μmol/d/g）＝[(A 無土管-A 測定管+A 無基質管)×V 反總÷（ε×d）
×106
]÷W÷T=18.9×（A無土管-A測定管+A無基質管）
V反總：反應體系總體積，1.145×10-3
L；ε：過氧化氫摩爾消光系數，4.36×104
L / mol /cm；
d：比色皿光徑，1cm； T：反應時間，20 min=1/72d； W：樣本質量，0.1g。
土壤過氧化氫酶（Solid-Catalase，S-CAT）試劑盒說明書
